正在荧光光谱中，来自宽带光源或者激光的光入射到样品上，而后样品能够会收回薄弱的荧光旌旗灯号。荧光滤光片组凡是由激起滤光片、二向色镜（二向分光镜）以及发射滤光片构成，它们组合正在一个滤光片立方体中。激起滤光片用于确保只要所需波长入射到样品上，而发射滤光片用于传送荧光旌旗灯号并回绝激起光以及任何没有需求的光。二向色镜凡是以 45° 的入射角运用，以将激起光反射到样品并将发射旌旗灯号传输到检测器。激起、发射以及二向色滤光片凡是成组运用，以最年夜化所需旌旗灯号并最小化任何没有需求的旌旗灯号。
（荧鲜明微镜道理）
生物荧光剖析经常使用的便是荧光光谱法剖析，经常使用于共聚焦光路以及流式细胞术中。
（共聚光路）
流式细胞剖析的光学零碎
光学零碎由激光器以及多少组透镜、滤光片及小孔构成，它们辨别将差别波长的荧光旌旗灯号送入到差别的电子探测器。其次要光学元件是分色反射镜(DL)以及滤光片(filter)。分色反射镜(488DL、550DL、600DL、640DL)用于挑选被测荧光波长，只答应年夜于特定波长的光经过，而将小于特定波长的光反射到光电检测器（长波通特征）。滤光片普通分为三类：长通滤片(long pass filter，LP)、短通滤片(short pass filter，SP)以及带通滤片(band pass filter，BP)。
比方，FITC染料发射出525 nm的绿色荧光，PE染料发射出575 nm的橙色荧光，辨别挑选550DL以及525BP构成的滤片组以及600DL以及575BP滤片组，便可到达特异地接纳FITC以及PE荧光旌旗灯号的目标。光电倍增管以及硅光电二极管，可辨别将侧向散射光以及前向散射光和525～675等差别的荧光旌旗灯号搜集检测。
（流式细胞仪道理图）
道理描绘：单细胞液流颠末细胞室，激光映照细胞(或者微粒)，细胞或者微粒华体育app下载方式上承载的荧光抗体被激起后收回特定波长的荧光，并辨别经过差别滤光片，检测器搜集差别波长的荧光旌旗灯号，经较量争论机剖析处置，将各通道的数字转换为图形表现进去。
荧光滤光片参考
荧光滤光片（单波段带通）通带(nm)任务波段(nm)BP377带通滤光片352 - 402200 — 700BP475457.5-492.5200—1000BP559542 - 576200—1000BP434425.5-442.5200—1000BP469451.5-486.5200—1000BP497489 - 505200—1000BP531511 - 551200—1000BP628608 - 648200—1000BP655635 - 675200—1000发射荧光片（单波段带通）通带(nm)任务波段(nm)BP532505.5 - 544.5200 - 740BP479459 - 499200 - 770BP530508.5 - 551.5200 - 800BP535524 - 546200 - 800BP447417 - 477200 - 1000BP593573 - 613400 - 925BP692672 - 712400 - 925BP716696 - 736400 - 925BP630595 - 664515 - 800二向色镜（长波荧光）通带范畴（nm）反射范畴（nm）DMLP409415 - 570327 - 404DMLP452460 - 610423 - 445DMLP497505 - 800452 - 490DMLP499508 - 675470 - 490DMLP516520 - 700490 - 510DMLP562569 - 730490 - 555DMLP582595 - 800533 - 580DMLP660669 - 726594 - 651DMLP685695 - 810600 - 676-华体会app 上一篇:华体会app-什么是合色棱镜？它对投影仪有哪些作用？ 下一篇:华体会app-二向色镜在生物荧光分析的作用
